بررسی سطح سرمی و پلی مورفیسم TNF-α و IFN-γ به روش های ELISA و PCR-RFLP در بیماران مبتلا به سل ریوی و مقایسه آن با افراد سالم

زمینه و اهداف: مقاومت یا ایمنی سلولی در برابر عفونت توبرکولوز، بستگی به عملکرد لمفوسیت های T، که فعال کننده ماکروفاژهای از بین برنده مایکوباکتریوم های داخل سلولی اند، دارد. لمفوسیت های T از طریق ترشح شبکه ای از فاکتورهای محلول سایتوکاین ها، مسوول این روابط سلولی اند و طی سه دهه اخیر به طور گسترده مورد مطالعه قرار گرفته اند. اولین رخداد عفونت در میزبان با یک پاتوژن، پاسخ ایمنی ذاتی است که شامل عملکرد سایتوکاین هایی همچون TNF-γ و IFN-α می باشد. هدف از این مطالعه، تعیین فراوانی موتاسیون های ژن TNF-γ و IFN-α به روش PCR-RFLP و اندازه گیری سطح سرمی این دو سایتوکاین در دو گروه شاهد و بیمار به روش ELISA و ارتباط آنها با بیماری سل ریوی بود. روش بررسی: در این مطالعه مورد - شاهدی case-control) 93) بیمار مبتلا به سل ریوی با اسمیر مثبت از بیمارستان مسیح دانشوری انتخاب شدند. گرده شاهد شامل 103 فرد سالم، بدون هیچ سابقه به توبرکولوز بود. ژنوتیپ پنج ناحیه از TNF-a و یک ناحیه از IFN-γ با استفاده از روش PCR-RFLP شناسایی شد. میزان سطح سرمی این دو سایتوکاین با استفاده از روش ELISA بررسی شد. اطلاعات روش ELISA با آزمون Mann-Withney U بدست آمد. برای یافتن نقطه حد نصاب (cut off)از ROC curve استفاده شد. داده های روش PCR-RFLP با آزمون دقیق فیشر، تجزیه و تحلیل شد. یافته ها: با روش PCR-RFLP، تفاوت معنی داری در دو منطقه TNF-308 و TNF-857از نظر فراوانی موتاسیون میان دو گروه شاهد و مورد مشاهده شد .(P<0.05) در روش ELISA تفاوت معنی داری میان دو گروه شاهد و مورد درباره IFN- g وجود داشت (P<0.05). یک نقطه حد نصاب (cut off) به عنوان مارکر سرولوژیک برای بررسی سریع تر توبرکولوز میان نقاط OD مثبت و منفی به دست آمد. این نقطه cut off برایIFN- g ، 0.19mg/dl بود. نتیجه گیری: موتاسیون در دو نقطه -857 و FNF-a -308 به طور معنی دار دیده شد. این تفاوت در هیچ یک از نقاط دیگر TNF-a و IFN-γمشاهده نشد. نتایج روش ELISA نشان داد پاتوژن های مایکوباکتریایی به تولید سایتوکاین -هایی نظیر IFN-γ به طور فراوان وابسته هستند. تست های سرولوژیک، با توجه به نقطه حد نصاب IFN- γ) ctu off)، به بیماران کمک می کند تا در افراد توبرکولوز مثبت، نتایج سریع تر مورد شناسایی قرار گیرند.